Western Blot
免疫印跡immunoblotting又稱蛋白質(zhì)印跡western blot，它是根據(jù)抗原抗體的特異性結合檢測復雜樣品中的某種蛋白的方法。Western blot是在凝膠電泳和固相免疫測定技術基礎上發(fā)展起來的一種新的免疫生化技術。由于western blot具有SDS-PAGE的高分辨力和固相免疫測定的高特異性和敏感性，現(xiàn)已成為蛋白分析的一種常規(guī)技術。Western blot常用于鑒定某種蛋白，并能對蛋白進行定性和半定量分析。
華科鑒聯(lián)基因科技為提供標準western blot技術服務（您只需提供樣本），并對band進行灰度分析，得出蛋白表達相對定量結果。
服務要求
需新鮮或正確保存的蛋白樣品或者蛋白粗提液，陽性對照樣品（如果有）， 檢測目的蛋白的一抗（或由華科鑒聯(lián)基因科技代購）。組織樣品不少于50mg；細胞不少于5×106個；總蛋白濃度不低于 2μg/μl（至少50μl）。
服務基本流程
1. 蛋白提取和定量（如果提供蛋白樣品，則直接電泳預實驗檢測抗體特異性）；
2. SDS-PAGE 10-15% 變性聚丙烯酰胺凝膠電泳；
3. 轉膜（PVDF膜）；
4. 封閉 （5%脫脂奶粉）；
5. 一抗孵育（其中內(nèi)參基因為Tubulin或HistoneH3.1）；
6. 二抗孵育（如果由于材料降解或一抗造成實驗無法繼續(xù)，則收相關預實驗費用）；
7. 顯色（ECL）；
8. 曝光、洗片、灰度分析；
實驗報告內(nèi)容
蛋白濃度，膠片，膜，以及灰度分析（如果需要）及實驗報告
